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CRM-YTX-c蝦夷扇貝毒素溶液的制備

YTX是從新西蘭Cawthron研究所(Cawthron Institute,Cawthron Institute)培養(yǎng)的甲藻中分離得到的，YTX的制備和純化是在Cawthron研究所進(jìn)行的。最后在NRC、Halifax上進(jìn)行了純度測(cè)定，用1HNMR和高分辨LC-MS確證了YTX的結(jié)構(gòu)和純度。測(cè)定了YTX的[M-H]離子的測(cè)量精度m/z為1141.4704±0.0001(4=-1.1ppmC55H81O21S2)(圖1A)。碰撞誘導(dǎo)離解光譜(圖1B)與以前的YTXCRMS和文獻(xiàn)報(bào)道相匹配[4]。通過將純化的YTX溶解在CD:OH中制備了一種原料溶液，用于定量核磁共振[5]。通過對(duì)qNMR原液的準(zhǔn)確稀釋、高純度的甲醇，制備了CRM溶液，并將其分配到清潔的氬填充琥珀玻璃片中，并立即進(jìn)行火焰密封。

分析方法與價(jià)值分配

CRM-YTX-C的驗(yàn)證值是基于NRC使用兩種方法得到的結(jié)果:qNMRon庫存YTX溶液使用NLST苯甲酸SRM作為校準(zhǔn)劑，LC-MSMS采用酸性pH流動(dòng)相使用CRM-YTX-b(批號(hào)20120328)進(jìn)行校準(zhǔn)。

同質(zhì)性

從FLAL系列中篩選出具有代表性的CRM-YTX-c安瓿(n=25)，用方差分析(ANOVA)對(duì)LC-MS/MS測(cè)定的YTX濃度進(jìn)行評(píng)價(jià)，并檢測(cè)出不顯著的異質(zhì)性。

穩(wěn)定性研究

對(duì)CRM-YTX(批號(hào)20060308)進(jìn)行了短期和長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究，由于其生產(chǎn)過程和濃度范圍與CRM-YTX-c蝦夷扇貝毒素溶液相當(dāng)，穩(wěn)定性比較合理，穩(wěn)定性研究表明YTX在-12°甲醇中的降解不明顯，持續(xù)時(shí)間為一年。

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